Kit Ujian NEFA ialah alat untuk kuantifikasi NEFA

Kit Ujian NEFA ialah alat untuk pengiraan NEFA (Nitric Oxide). Ia digunakan untuk menentukan kepekatan NEFA dalam sampel darah atau tisu. NEFA ialah nutrien penting yang bertanggungjawab untuk mengawal selia metabolisme tenaga, keceriaan jantung, pengaliran neuromuskular, tekanan darah dan pembekuan darah. Ia didapati terutamanya dalam tulang, otot, tisu lembut dan sel darah merah.

Persediaan

NEFA ialah protein kecil 50.2 kDa yang mempunyai keupayaan untuk mengikat DNA. Ia adalah kompleks asid lemak sintase (FAS) jenis sitosolik I yang menghasilkan asid palmitik yang tidak diester. Dengan kehadiran Acyl-CoA oxidase (ACS), kompleks FAS mengoksidakan 3-methyl-N-ethyl-N-(b-hydroxyethyl)-aniline kepada 4-aminoantipyrine, yang merupakan prekursor molekul untuk asetil-CoA. Proses ini adalah proses enzimatik yang penting untuk semua organisma eukariotik.

Walaupun NEFA mungkin tidak mempunyai jisim lemak yang besar, ia merupakan sumber bahan api yang penting untuk tisu periferi. Ia dimetabolismekan oleh hati dan diangkut kompleks dengan albumin ke tisu periferal. NEFA juga dikeluarkan oleh domain thioesterase (TE) kompleks FAS.

Pipet

Kit ELISA digunakan untuk mengesan sebatian kimia kecil, protein dan peptida. Kit ini adalah berdasarkan protein rekombinan yang dinyatakan dalam E.coli. Kit tidak mengandungi azida, thimerosal dan sumber semula jadi lain.

Dalam kit, terdapat reagen seperti BSA, penimbal pencairan bebas pyrogen dan larutan pencuci. Larutan pencuci stabil selama dua minggu pada suhu 2-8degC. Penampan pencairan mengandungi 0.9% garam fisiologi.

Kit ini mempunyai standard NEFA dalaman. Ini ditambah dengan NEFA pada kepekatan yang sepadan dengan kepekatan yang dijangkakan dalam sampel. Penyerapan pigmen biru-ungu pada 546nm diukur untuk mengira kepekatan NEFA dalam sampel.

Colorimetric

Menggunakan kit WAKO NEFA telah menimbulkan pelbagai hasil, termasuk beberapa yang tidak masuk akal. Namun begitu, kit NEFA adalah pesaing yang layak untuk menentukan kandungan asid lemak relatif sampel tisu haiwan. Oleh itu, kit NEFA adalah salah satu ujian makmal yang lebih popular. Kit ini disertakan dengan arahan untuk menguji pelbagai jenis sampel, termasuk darah, serum, air liur dan pelbagai lipid.

Bahagian kit yang paling menarik ialah ia boleh digunakan untuk mengukur pelbagai asid lemak, termasuk yang biasa ditemui dalam lipid. Kit ini dilengkapi dengan pelbagai enzim yang direka untuk mengesan pelbagai asid lemak, termasuk asid lemak C-8 dan C-16 yang terdapat pada manusia dan haiwan. Namun begitu, kit ini tidak disyorkan untuk digunakan dalam kepekatan FFA berketepatan tinggi dalam julat yang luas.

Elektrokimia

NEFA ialah asid lemak penting dalam kesihatan manusia, tetapi jarang dinilai. Di samping itu, pengesanan mereka sangat mahal. Oleh itu, pemantauan perubahan dalam kepekatannya boleh membantu dalam pencegahan dan pengurusan penyakit yang lebih tepat. Dalam kajian ini, kit ujian elektrokimia untuk NEFA telah dibangunkan, menggunakan PDA-MWCNT sebagai permukaan sensor. Elektrod ini mempamerkan aktiviti elektrokatalitik yang baik untuk langkah pengoksidaan NEFA, dan boleh digunakan dalam aplikasi kehidupan sebenar.

Elektrod enzim terdiri daripada filem komposit berbilang lapisan PDA-MWCNT dan ACOD, ACS, dan polimer. Susunan lapisan dipilih untuk memadankan susunan tindak balas enzimatik. Ia telah ditentukan bahawa ACS dan ACOD kekal aktif secara biologi dalam filem itu.

Kepekatan NEFA dalam T2D

Kepekatan NEFA dalam darah telah dikaji dalam konteks obesiti dan hipertensi. Sebatian ini telah ditunjukkan untuk menggalakkan peningkatan BP melalui rangsangan a1-adrenergik dan meningkatkan tekanan oksidan. NEFA juga dikaitkan dengan sindrom metabolik. Sebatian ini mungkin penting dalam perkembangan hipertensi.

Beberapa model telah dicadangkan untuk menerangkan tindak balas NEFA plasma terhadap cabaran glukosa intravena. Model Boston dengan tepat menggambarkan fasa keempat peningkatan kepekatan NEFA. Walau bagaimanapun, model itu tidak menerangkan fasa kependaman awal. Model Fabian menggunakan cerun eksponen mudah untuk menerangkan fasa ini. Begitu juga, model Thomaseth tidak dapat menggambarkan fasa lantunan semula.

Tahap NEFA dalam trigliserida

Beberapa kajian telah menyiasat kesan pembedahan bariatrik pada komposisi NEFA plasma. Dalam meta-analisis yang diterbitkan pada 2016, paras NEFA serum telah menurun pada 6 dan 12 bulan selepas pembedahan. Ini mungkin disebabkan oleh tahap insulin yang berkurangan. Dalam kajian lain, NEFA plasma diukur dalam sekumpulan pesakit obes sebelum dan selepas pembedahan pintasan gastrik Roux-en-Y.

Kepekatan tujuh NEFA dikurangkan pada 9 bulan selepas pembedahan. Linoleat (asid lemak omega-6) dikurangkan sebanyak 18:2, stearat sebanyak 18:0, dan oleat sebanyak 16:0. Walau bagaimanapun, kepekatan docosahexaenoate tidak terjejas. NEFA telah ditukar kepada ester metil asid lemak (FAMEs). Ini kemudiannya dianalisis dengan kromatografi gas-spektrometri jisim (GC-MS).